液氮罐短期儲(chǔ)存胚胎的可行性研究的討論

小鼠胚胎冷凍保存的成功，極大地推動(dòng)了低溫生物學(xué)的發(fā)展。胚胎冷凍保存現(xiàn)已成為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保種的重要手段之一。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物胚胎庫(kù)較活體保種有著經(jīng)濟(jì)又安全的優(yōu)勢(shì)。而通過(guò)胚胎引種因?yàn)榭旖荻畠r(jià)，使得國(guó)內(nèi)外的胚胎運(yùn)輸也變得日益廣泛。

氣相液氮運(yùn)輸罐不同于傳統(tǒng)的也相液氮罐，凍存的胚胎不直接接觸液氮。它的罐壁內(nèi)層有一層液氮層，液氮層吸附大量液氮，并向外排出液氮蒸汽來(lái)使罐內(nèi)溫度達(dá)到一188℃至一194℃。胚胎不接觸液氮，能降低胚胎之間的交叉感染。同時(shí)操作時(shí)不會(huì)被液氮凍傷，增加了安全性。

本次實(shí)驗(yàn)中采用C57BL／6、B6D2、DBA／2、B10A4個(gè)小鼠品系，是因?yàn)槠渲屑扔薪幌怠⑼愊担灿须s交F1代。4個(gè)品系的冷凍胚胎在氣象液氮運(yùn)輸罐存放14天的復(fù)蘇率與保存在氣相液氮罐的胚胎復(fù)蘇率均無(wú)差異；C57BL／6、B6D2、DB舭這3個(gè)品系的出生率也無(wú)差異。結(jié)果中B10A小鼠的出生率的差異顯著可能時(shí)因?yàn)楸敬螌?shí)驗(yàn)的時(shí)間跨度較大。

從3月份一直持續(xù)到5月份，3月份放置氣相液氮運(yùn)輸罐的室溫為ll℃，5月份為18℃。環(huán)境溫度可能會(huì)使氣相液氮罐內(nèi)的液氮蒸汽消耗過(guò)快，罐體內(nèi)溫度便會(huì)上升，而且環(huán)境溫度還會(huì)在胚胎的轉(zhuǎn)移過(guò)程中產(chǎn)生影響。

所以在盡量使放置氣相液氮運(yùn)輸罐的環(huán)境保持比較低的溫度，本實(shí)驗(yàn)胚胎在氣相液氮罐存放時(shí)間zui長(zhǎng)為14 d，因?yàn)楸敬螌?shí)驗(yàn)考慮到國(guó)際運(yùn)輸所需時(shí)間較長(zhǎng)，所以胚胎每次存放時(shí)間都使用了氣相液氮運(yùn)輸罐保存時(shí)間的上限。另外胚胎每次存放的數(shù)量較少，因此胚胎都在罐體的底部，是整個(gè)罐體溫度zui低的地方。

考慮到實(shí)際運(yùn)用中的運(yùn)輸時(shí)間會(huì)有長(zhǎng)短以及運(yùn)輸胚胎時(shí)數(shù)量較多時(shí)，一根冷凍管夾可能會(huì)放上4個(gè)冷凍管，所以胚胎就不一定都位于罐體的底部。有關(guān)胚胎在氣相液氮運(yùn)輸罐不同保存時(shí)間以及不同存放高度的保存結(jié)果，有待進(jìn)一步研究。